您好！歡迎訪問(wèn)上海牧榮生物科技有限公司網(wǎng)站！
咨詢熱線
17621170138
17621170138
為還原貼壁細(xì)胞（例如上皮細(xì)胞）表型的天然環(huán)境，通常會(huì)將它們接種到經(jīng)組織培養(yǎng)物處理的表面上，并在此附著存活和增殖。 如需進(jìn)行增殖、計(jì)數(shù)和下游分析，必須解離貼壁細(xì)胞和來(lái)自實(shí)體組織的細(xì)胞，形成懸浮液。 單細(xì)胞懸液是細(xì)胞計(jì)數(shù)、傳代培養(yǎng)再接種和細(xì)胞測(cè)定/分析必需成分。
解離試劑包括天然存在的酶、較為溫和的非酶替代物；也可通過(guò)螯合鈣防止鈣粘蛋白的附著而實(shí)現(xiàn)解離，從而將細(xì)胞與表面或相互脫離。細(xì)胞解離試劑可能對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）底物具有特異性。
我們?nèi)娴募?xì)胞解離試劑產(chǎn)品線包括：
胰蛋白酶：用于常規(guī)細(xì)胞分離的動(dòng)物來(lái)源、重組型和StableCell 胰蛋白酶
胰蛋白酶-EDTA和EDTA溶液
ECM特異性膠原酶、彈性蛋白酶、分散酶
Accumax和Accutase非酶溶液
胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶，是常用的貼壁細(xì)胞系和組織解離酶之一。粗制胰蛋白酶制劑通常同時(shí)適用上述兩種應(yīng)用，但胰蛋白酶濃度過(guò)高或細(xì)胞孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)時(shí)，可能會(huì)損傷細(xì)胞膜并殺死細(xì)胞。從培養(yǎng)基質(zhì)上解離培養(yǎng)細(xì)胞的常用方法是聯(lián)合使用胰蛋白酶和EDTA（乙二胺四乙酸）處理，其中胰蛋白酶濃度范圍為0.025%至0.5%。
和標(biāo)準(zhǔn)胰蛋白酶溶液一樣，StableCell 胰蛋白酶溶液專用于細(xì)胞解離，但無(wú)需分液、冷凍和解凍。由于不再需要分液及等待胰蛋白酶解凍，此溶液為細(xì)胞傳代或相關(guān)實(shí)驗(yàn)節(jié)省了大量時(shí)間，也騰出了更多寶貴的實(shí)驗(yàn)室冷柜空間。建議2-8 °C儲(chǔ)存我們的StableCell™胰蛋白酶溶液，但我們自己開展的研究證明，37 °C儲(chǔ)存的StableCell™胰蛋白酶仍可保留>90%的活性和性能。
膠原蛋白酶可切割天然三螺旋膠原蛋白中的肽鍵。由于具有水解天然膠原蛋白的能力，其廣泛用于動(dòng)物組織細(xì)胞分離。膠原蛋白酶存在于多種微生物和不同的動(dòng)物細(xì)胞中。膠原蛋白酶是由厭氧細(xì)菌溶組織梭狀芽孢桿菌分泌的“粗制"膠原酶。
分散酶是一種快速、有效、溫和且中性的蛋白酶，可培養(yǎng)物中的完整上皮薄層與基質(zhì)的。分散酶I用于消化肺組織和處理細(xì)胞，適用于流式染色和鼠CD4 T細(xì)胞的分離。
針對(duì)需要更為溫和酶活性的細(xì)胞和組織，可采用濃度更低、效率更高的Accumax和Accutase酶溶液酶溶液解離或分離。上述溶液：
可有效分離胚胎和神經(jīng)干細(xì)胞
解離溫和，可保留細(xì)胞活力并增加細(xì)胞產(chǎn)量
無(wú)需中和
掃一掃，關(guān)注微信
當(dāng)前位置：